1.培养基灭菌后,需冷却至50℃左右时才能倒平板。
2.左手拿培养皿,右手拿锥形瓶,左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开。
3.整个操作在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。
4.平板冷却后要倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。
5.若倒平板时,培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板应丢弃。
二、平板划线操作
1.第一次划线及每次划线之前都要灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环,每次灼烧目的总结如下表:
2.灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
3.划线时最后一区域不要与第一区域相连。
4.划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。
三、稀释涂布平板
1.稀释操作时:
每支试管及其中9mL水、移液管均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰1-2cm处。
2.涂布平板时:
①涂布器用70%酒精消毒,取出时,多余酒精在烧杯中滴尽,沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃。
②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。
③酒精灯与培养皿距离要合适,移液管头不要接触任何物体。