首先,需要构建一个质粒,其中包含要转入植物的外源基因。这个质粒通常包括目标基因、选择标记基因(用于筛选转化植物细胞的基因,比如抗生素抗性基因)、启动子、终止子以及其他调控元件。

1. 构建质粒:
首先,需要构建一个质粒,其中包含要转入植物的外源基因。这个质粒通常包括目标基因、选择标记基因(用于筛选转化植物细胞的基因,比如抗生素抗性基因)、启动子、终止子以及其他调控元件。2. 根癌农杆菌培养:
质粒构建完成后,将其转入根癌农杆菌中。培养这些农杆菌,使其含有目标基因的质粒。3. 感染植物组织:
目标植物组织(例如叶片、茎尖或愈伤组织)与含有目标基因的根癌农杆菌进行共培养。农杆菌通过感染植物组织将质粒引入植物细胞中。4. 基因转移:
农杆菌通过其Ti质粒(tumor-inducing plasmid)中的一段DNA片段(T-DNA,转座DNA)将目标基因导入植物细胞的染色体中。这个T-DNA通常包含了目标基因和选择标记基因。