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【金线莲种子】怎样解决金线莲种子自然萌发成苗效率低的技术问题?

金善莲种子自然萌发,如何解决育苗效率低的技术问题?

金善莲属兰科,唇兰属植物,为地生兰。

金线莲不仅药用价值高,在民间素有“药王”、“金草”等美誉,同时也是一种极具观赏价值的室内观赏珍品。金线莲种子发育不全,没有胚乳,自然条件下很难独立萌发成苗,再加上近年自然环境遭受严重破坏,鸟、虫、蛇等为害,人工的过度挖掘,使野生金线莲濒临灭绝。

在这种情况下,金线莲的人工培养技术显得尤为重要,而人工培养条件下,种子萌发成苗仍然是整个培养过程的技术瓶颈之一,由于缺乏有效的诱导方法,因此现有技术中金线莲种子的萌发率较低。尽管有研究者进行了大量尝试,但目前仍未取得有效的萌发促进方法,严重制约了金线莲培养技术的规模化应用。

1 内生真菌的获得

将野生金线莲的根采下,自来水洗净泥沙,肥皂水浸泡10-20min,冲洗干净,75%酒精表面消毒30s,0.1%升汞消毒5min,最后无菌水冲洗5遍。将每条根剪成若干0.5-1.0cm的根段,平放在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA平板培养基,事先灭菌,分装在无菌的培养皿中)上,每个培养皿接5个根段。对照组为最后一次的清洗液,涂在培养皿中,接种40个培养皿,封口膜封好放于28℃恒温培养箱中进行暗培养。

待菌长出后,通过划线的方法进行纯化。在超净工作台上,用接种针轻轻挑起少许菌丝,在PDA平板培养基上划斜线,随后用封口膜封好培养皿。观察菌产生的菌落形态,合并相同形态的菌,将分离出的纯菌继续用PDA平板培养基培养,纯菌接种于试管中于-20℃冰箱中保存。

待金线莲种子成熟时,将真菌从冰箱中取出,用接种针逐一挑出真菌接种在PDA培养基上,放于28℃恒温培养箱中进行暗培养。培养7-lOd后进行共生培养研究。

2.真菌与种子共生培养

将发酵好的牛粪和木屑基质,加入少量蒸馏水,用手握基质湿润又捏不出水即可,分装在若干培养瓶中,高温高压灭菌冷却,备用。

按照常规兰科种子消毒方法对金线莲茹果进行消毒,用解剖刀将茹果划开,将种子抖落在灭好菌的牛粪和木屑基质中。分别在PDA培养基上截取lcmX 1cm真菌小块,放于播完种的牛粪和木屑基质中,每种真菌在2种基质中各接种3瓶。空白对照只播种不接种真菌。将接完菌和种子的培养瓶放于28℃黑暗条件下培养1周,随后培养条件为光照时间12h/d,光照强度为2000-25001x,培养温度26±2 ℃,观察种子萌发情况。

责任编辑: 鲁达

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